大分子单克隆抗体标记条件

  大分子单克隆抗体标记条件
 
① 金垫标记条件：
a. 1 ml金液（20nm左右）+45 微升 （ 1%K₂CO₃）+ 5mg/ml 抗体 1 ul，即标记量为5微克蛋白/ ml 金液。
    b，室温振荡. 20-30分。
c. 加封闭液20 ul/ml，室温振荡.20- 30分
  d. 离心12000转，10分钟
    e. 150 ul复溶液复溶（PH8.2），铺金
② C线划线： 羊抗鼠  1：30-1：100
③ T线划线： 做梯度。1：10-1：100
注意事项： 
1，每种蛋白抗体的物理性质不同，所以不能用一贯的千篇一律的加氯化钠的方式看稳定性，要看最终T线颜色的深度。
2， （ 每个项目期初必须做两个条件：1是先加碳酸钾后加抗体；2是先加抗体后加碳酸钾，每种抗体不同，先后顺序直接决定线条的有无）。
3，当标记时或者吹干后出现发紫，发灰，用保护剂便可解决 。
4，  1%K₂CO₃  配置是1g 碳酸钾加到100ml水里。