呋喃唑酮人工抗原合成与鉴定
158 人阅读发布时间:2022-03-30 23:03
1.重氮法合成呋喃唑酮人工抗原
- 称取呋喃唑酮(2-np-aoz)5mg,溶解于500ul的乙jing中,再加入2 mL 1 mol/L的盐酸,搅拌并加入2 mg锌粉,振荡混匀。将混合液置于80 ℃的水浴中加热20 min,取上清冷却至4 ℃ .取冷却后的呋喃唑酮还原液2mL,用1 mol/L的盐酸调pH值至1~2;往上述溶液中逐滴加入2 mol/L的亚硝酸钠溶液并搅拌,直至淀粉碘化钾试纸检验呈灰蓝色时,停止滴加;
- 称取50 mg BSA,溶解于1 mL 0.01 mol/L pH 7.4的PBS中,冷却至4℃,将1)中溶液逐滴加入到BSA溶液中并搅拌混匀;往上述混合液中加入适量1 mol/L的氢氧化钠溶液,pH值调为8.5;所得混合液在避光条件下振荡1h后,放置在4℃冰箱过夜,得到2-np-aoz- BSA偶联产物。