ELISA鼠多抗测试效价参考步骤
224 人阅读发布时间:2022-03-30 22:59
- 板子包被: 默认1微克/ml包被,4度过夜包被24小时。
- 封闭: 10%BSA 用0.01mpbs配制,PH7.4。37度2小时。
- 不要洗板,筛掉封闭液,37度烘干10分钟,然后装入自封袋中,放置-20度冻存。
- 加血清抗体:100µL/孔 1000开始倍比稀释,用E1稀释液稀释。用盖板膜盖板后置37℃避光环境中反应30min。
- 洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,
加入1*洗涤工作液300 µL/孔,每次静置20s,甩去孔内液体,重复洗涤3次,最后一次用吸水纸拍干(拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破)。
- 加酶标物:加入酶标物100 µL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置37℃避光孵育30 min。
- .甩干孔内液体,重复洗板3次,最后一次用吸水纸拍干。
- 显色:加入底物液A液50 µL/孔,再加底物
液B液50 µL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置37℃避光环境中反应10min。
注意先加A再加 B,AB枪头一定更换,勿混用。
- 测定:加入终止液50µL/孔,用酶标仪立即 测定450/630nm处的吸光度值。
资料格式:
ELISA鼠多抗测试效价参考步骤.docx
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