1、甘草酸
结构式：

步骤：
      利用高碘酸钠，将甘草酸（GA）的甲醇溶液(称取10.4 mg的GA溶于0.54 mL甲醇)逐滴加入NalO4溶液内( 10 mg NalO4溶于0.8 mL的蒸馏水)，搅拌1h后，再将含有BSA的50 m mo/L(PH 9.6)的碳酸缓冲液(称取10 mg的BSA溶于2.8 mL碳酸缓冲液)慢慢加入到上述反应液中，用1 mol/L的Na2CO3调整反应混合液的PH值至9.0，于室温下搅拌6h后，将反应液对蒸馏水透析3天，再经冻干处理，即得到GA-BSA复合物。GA-HSA包被抗原的合成方法同GA-BSA。

GA-BSA的合成路线


2、多效唑
结构式：

步骤：为合成新的、有效的多效唑人工抗原，采用脱珀酸酐法对多效唑小分子进行结构修饰，以获得含俊基的多效唑半抗原。将纯化后的半抗原分别与牛血清白蛋白和卵清蛋白经N经基琥珀酰亚胺活泼酯法偶联制备免疫原和包被原。
（1）多效唑半抗原的制备
    选用微波无溶剂法合成多效唑半琥珀酸酯( paclobutrazolhemisuccinate, PAC-HS)。用无水吡啶做溶剂，按照多效唑、琥珀酸酐、DMAP物质的量比1:20:1的比例混合均匀，氮气吹干溶剂。将混合物置于微波炉中间歇反应2.5 h。反应结束后加入2 mL氯仿溶解，取出混合物离心去沉淀，取上清液再加入2 mL二次水，涡旋振荡2 min，以除去副产物丁二酸。取有机相，氮气吹干，得到多效唑半抗原。其合成路线见图1。

（2）NHS活泼酯法制备免疫抗原
准确称取2mg PAC-HS溶于200µL DMF中，加入NHS 4 mg (另溶200 μL DMF)，再加入7.5 mg称量好的EDC室温下振荡反应16h (溶液1) :称取8.7 mg BSA (PAC-HS与BSA的物质的量比为39:1)溶于1.6mL 1× PBS中(溶液2)。再将溶液1逐滴加入溶液2中，边加边振荡，冰浴振荡反应6h。反应混合物移入处理好的透析袋中，用1× PBS透析3d，每天换两次透析液，即得到多效唑免疫抗原(PAC-HS-BSA)，合成路线见图2。